โครโมโซม เงื่อนไขต่อไปสำหรับการได้รับเพลตเมทาเฟสที่ดีคือเซลล์ไฮโปโทนไลเซชัน ไฮโปโทนิกช็อก โดยปกติจะใช้สารละลายโพแทสเซียมคลอไรด์หรือโซเดียมซิเตรตแบบไฮโปโทนิก ในสารละลายไฮโปโทนิก เซลล์จะบวม เยื่อนิวเคลียสแตก พันธะระหว่างโครโมโซมแตก และโครโมโซมจะลอยอย่างอิสระในไซโตพลาสซึม การเพาะเลี้ยงเซลล์ การใช้ โคลเซมิด และ ภาวะไฮโปโทนเซชัน กลายเป็นเงื่อนไขบนพื้นฐานของวิธีการสร้างเซลล์พันธุศาสตร์สมัยใหม่

สารแขวนลอยในเซลล์ได้รับการแก้ไขด้วยส่วนผสมของเมทานอลและกรดอะซิติก จากนั้นสารแขวนลอยจะถูกหมุนเหวี่ยงและเปลี่ยนสารตรึง ส่วนผสมของเซลล์ที่มีสารตรึงสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิเพิ่มขึ้น 4 องศาเซลเซียส เป็นเวลาหลายสัปดาห์ เมื่อสารแขวนลอยดังกล่าวถูกนำไปใช้กับแผ่นกระจกที่สะอาด เซลล์เมตาเฟสจะขยายออกและโครโมโซมที่แยกจากกันจะอยู่ภายในนั้น เมื่อสารยึดติดแห้ง โครโมโซมจะติดอยู่กับแก้ว

วิธีการที่อธิบายไว้ข้างต้นสำหรับการรับยาจากการเพาะเลี้ยงเซลล์เม็ดเลือดขาวซึ่งใช้บ่อยที่สุด สำหรับวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัย การเตรียมสามารถเตรียมได้จากคอเรียน ไขกระดูก อัณฑะ การเพาะเลี้ยงไฟโบรบลาสต์ การเพาะเลี้ยงแอมนิโอไซต์ ขั้นตอนสำหรับแต่ละวัตถุแตกต่างจากที่อธิบายไว้ข้างต้น แต่หลักการทั่วไปยังคงอยู่ การสะสมของ ระยะเมตาเฟส ภาวะไฮโปโทนเซชัน การตรึง การหยดบนสไลด์แก้วการย้อมสี คาริโอพิมพ์

การเตรียมการย้อมสี ขั้นตอนต่อไปของวิธีการทางเซลล์พันธุศาสตร์คือการย้อมสีของสารเตรียม วิธีการย้อมสีนั้นง่าย แตกต่าง ฟลูออเรสเซนต์ วิธีการย้อมสีที่ใช้กันมากที่สุดตามแนวคิดของ กิมซ่า หรือการย้อมสีอย่างง่าย คำว่า การย้อมสีตามปกติ เป็นเรื่องธรรมดาในวรรณคดีภาษารัสเซีย สีย้อม กิมซ่า ย้อมโครโมโซมทั้งหมดเท่าๆ กันตลอดความยาวทั้งหมด ในเวลาเดียวกัน เซนโทรเมียร์ ดาวเทียม บางครั้งมี เส้นใยดาวเทียม และ โครงร่างที่สอง กลไกการจับสีย้อม

ด้วยการย้อมอย่างง่าย การระบุกลุ่มของโครโมโซมเท่านั้นจึงเป็นไปได้ ดังนั้นวิธีนี้จึงใช้สำหรับการกำหนดความผิดปกติของโครโมโซมเชิงตัวเลขโดยประมาณ ความผิดปกติของโครงสร้างโครโมโซม การหลุด การโยกย้าย การผกผัน ที่ตรวจพบโดยการย้อมสีอย่างง่ายควรระบุโดยใช้การย้อมสีที่แตกต่างกัน การย้อมอย่างง่ายใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาการกลายพันธุ์ของโครโมโซม การบัญชีสำหรับความผิดปกติของโครโมโซม

เมื่อทำการทดสอบปัจจัยทางสิ่งแวดล้อมสำหรับการกลายพันธุ์ แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงความผิดปกติที่เกิดขึ้นภายใต้อิทธิพลของรังสีและสารก่อกลายพันธุ์ทางเคมี วิธีการย้อมโครโมโซมอย่างง่ายเป็นวิธีเดียวในการศึกษาโครโมโซมของมนุษย์ถูกนำมาใช้จนถึงต้นทศวรรษ 1970 ด้วยความช่วยเหลือของมัน เป็นเวลากว่า 10 ปี การค้นพบโรคโครโมโซมหลัก บทบาทของความผิดปกติของโครโมโซมในการแท้งที่เกิดขึ้นเอง การผิดรูปแต่กำเนิด

และการเกิดมะเร็งได้แสดงให้เห็น และหลักการของการวัดปริมาณรังสีทางชีวภาพได้รับการพัฒนาขึ้น ความเป็นเนื้อเดียวกันทางสัณฐานวิทยาของโครโมโซมในความยาวในการเตรียมแบบมาตรฐานและการเตรียมแบบย้อมด้วย กิมซ่า นั้นทำให้เข้าใจผิด ความก้าวหน้าของไซโตจีเนติกส์ของมนุษย์ทำให้สามารถเปิดเผยความแตกต่างเชิงเส้นเชิงลึกได้ ไม่เพียงเฉพาะหน้าที่เท่านั้น แต่ยังรวมถึงโครงสร้างของโครโมโซมด้วย ในช่วงทศวรรษที่ 70

มีการฝึกฝนวิธีการย้อมสีที่แตกต่างกัน ภายใต้การย้อมสีที่แตกต่างกันของโครโมโซมเป็นที่เข้าใจกันว่าความสามารถของพวกมันในการเลือกย้อมสีตามความยาวโดยไม่มีการดัดแปลงภายในโดยอิทธิพลใดๆ การย้อมสีที่แตกต่างกันของโครโมโซมนั้นมาจากผลกระทบของเกลืออุณหภูมิที่ค่อนข้างง่ายบนโครโมโซมคงที่ ในเวลาเดียวกันมีการเปิดเผยความแตกต่างทางโครงสร้างของ โครโมโซม ตามความยาวซึ่งแสดงออกในการสลับกันของ eu- และเฮเทอโรโครมาติก

พื้นที่ แถบสีเข้มและสีอ่อน ความยาวของส่วนเหล่านี้มีความเฉพาะเจาะจงสำหรับแต่ละโครโมโซม แขนและบริเวณที่สัมพันธ์กัน การย้อมแบบดิฟเฟอเรนเชียลจะระบุโครโมโซม แขน และแม้แต่บริเวณเฉพาะทั้งหมด โครโมโซมแต่ละตัวมีรูปแบบลายเส้นของตัวเอง ด้วยการย้อมสีที่แตกต่างกันของโครโมโซมเมทาเฟสใน ในขั้นต้นควินารีน มัสตาร์ดใช้สารเรืองแสง อัลคิลเลต สำหรับการย้อมโครโมโซมแบบพิเศษ ตัวแปรนี้เรียกว่าวิธีถาม ซึ่งต้องใช้การประมวลผลยาอย่างรวดเร็ว

ซึ่งไม่สะดวกเสมอไป หากต้องการดูการเตรียมการ คุณต้องใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ ต่อจากนั้นจึงได้พัฒนาเทคนิคการย้อมสีแบบดิฟเฟอเรนเชียลโดยไม่ใช้สีย้อมเรืองแสง สีย้อม จีสเตน ที่ใช้กันอย่างแพร่หลาย ต้องเตรียมโครโมโซมก่อน บ่มในน้ำเกลือหรือน้ำย่อย การปรับสภาพล่วงหน้าจะทำลายโครงสร้างของโครโมโซมบางส่วน ในบางพื้นที่จะมีการฟื้นฟูโดยการย้อมสี ซึ่งจะทำให้โครโมโซมแต่ละเส้นมีลักษณะแยกส่วน

กลไกการสร้างปล้องยังไม่ชัดเจนเพียงพอ สันนิษฐานว่าส่วนที่ย้อมสีเป็นเฮเทอโรโครมาติก ซึ่งเป็นบริเวณที่มีการจำลองแบบช่วงหลังของโครโมโซมที่มีลำดับดีเอ็นเอซ้ำๆ ในขณะที่ส่วนที่ไม่มีสีเป็นบริเวณที่มียูโครมาติกซึ่งมีลำดับการเข้ารหัสอยู่ ในการระบุโครโมโซม นอกเหนือจากวิธีการตรวจหาความแตกต่างของโครงสร้างเชิงเส้น เราสามารถใช้คุณสมบัติที่สำคัญประการหนึ่งของโครโมโซมมนุษย์นั่นคือ การจำลองแบบอะซิงโครนัสตามความยาว วิธีนี้ได้รับการพัฒนา

โดยนักเซลล์พันธุศาสตร์ในประเทศที่มีความสามารถ เอเอฟ ซาคารอฟ เกี่ยวกับบทบาทของเขาในเซลล์พันธุศาสตร์สามารถอ่านได้ในซีดี ของลำดับการจำลองแบบ ขอบเขตการจำลองแบบไม่ช้าก็เร็ว นั้นมีความเฉพาะเจาะจงสำหรับแต่ละโครโมโซม อะนาลอกไทมิดีน 5 โบรโมไดออกซียูริดีนใช้เพื่อระบุลำดับการจำลองแบบ โครโมโซมบางส่วนที่รวมอะนาล็อกนี้มีการย้อมสีไม่ดี การใช้วิธีนี้ทำให้สามารถระบุโครโมโซมหรือการจัดเรียงโครโมโซมใหม่ได้

5 โบรโมไดออกซียูริดีนถูกนำเข้าสู่วัฒนธรรมเป็นเวลา 24 ชั่วโมงหรือมากกว่านั้นสำหรับการย้อมที่แตกต่างกันของโครมาทิดน้องสาว ถ้า 5 โบรโมไดออกซียูริดีน ถูกนำมาใช้สำหรับวัฏจักรเซลล์ที่สมบูรณ์ โครมาทิดที่เกิดขึ้นใหม่จะรวม อะนาล็อกของไทมิดีนและจะเปื้อนอย่างอ่อน โครมาทิดอีกอัน เปื้อนอย่างเข้มข้นตามปกติ วิธีนี้ช่วยให้ตรวจหาการแลกเปลี่ยนระหว่างโครมาทิดพี่น้องกันได้ง่าย ซึ่งจำนวนโครมาทิดที่เพิ่มขึ้นในโรคทางพันธุกรรมที่มีความไม่แน่นอนของโครโมโซม จำนวนของน้องสาวโครมาทิดยังเพิ่มขึ้นภายใต้อิทธิพลของการกลายพันธุ์ ดังนั้น วิธีการคำนึงถึงการแลกเปลี่ยนของโครมาทิดน้องสาวจึงถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษากระบวนการกลายพันธุ์ในมนุษย์

บทความที่น่าสนใจ :  ความงาม การทำศัลยกรรมประเภทให้ที่ได้รับความนิยมสูงสุด